使用偏光顯微鏡來做微生物形態(tài)與結(jié)構(gòu)的檢查
發(fā)布人：shpuda發(fā)布時間：2014/1/22
偏光顯微鏡放大法
1.普通光學偏光顯微鏡
普通光學偏光顯微鏡(light microscope)以可見光(日光或燈光)為光源，波長0.4μm-0.7，平均約0.5μm,其分辨距離為光波波長的一半，即0.25μm。0.25μm的微粒經(jīng)油鏡放大1 000倍后成0.25mm一般而言，徽生物(除絕大多數(shù)病毒外)的直徑都大于0.25μm，故可用普通光學顯微鏡予以觀察。如在光鏡上裝配暗視野聚光器，則成為暗視野顯微鏡。觀察時黑暗的背景中可看到發(fā)亮的國體，明暗反差提高了觀察效果，多用于不易染色的微生物(如螺旋體等)的形態(tài)和運動觀察。
相差偏光顯微鏡利用相差板的光柵作用，能顯示出徽生物結(jié)構(gòu)不同部位的差異?？捎糜谟^察微生物的形態(tài)、內(nèi)部結(jié)構(gòu)、運動方式及繁殖過程，多用于偏光顯微鏡不易觀察的不染色標本。熒光顯微鏡也是在普通光學顯微鏡的基礎上，采用縈外光或藍紫光為光源，配合熒光抗體染色，用于細菌自體熒光觀察和熒光蔭球的觀察。
2.電子偏光顯微鏡
電子偏光顯微鏡(electron microscope, EM)是利用電子流代替可見光波，電磁圈代替放大透鏡而組成的偏光顯微鏡。電子波長極短，約為。.005二。EM放大倍數(shù)可高達數(shù)十萬倍，能分辨，run的徽拉。不僅能看清徽生物的外形.內(nèi)部超徽結(jié)構(gòu)也可一覽無遺。電子偏光顯微鏡顯示的圖像，可投射到熒光屏上，也可拍成照片。
當前使用的電子偏光顯微鏡有兩類，即透射電子偏光顯微鏡(transmission electron microscope. TEM)和掃描電子偏光顯微鏡(scanning electron microscope, SEM), SEM的分辨率一般較TEM低，但可消楚地顯示物體的三維立體圖像。配合電子偏光顯微鏡觀察使用的標本制備方法有磷鎢酸或相酸筱負染色、投影法(shadowing，即以金屬噴涂投影，增強對比度，使圖像具有立體感)、超薄切片(ultrathin section)及冷凍蝕刻法(freeze etching)等。冷凍蝕刻法可更演晰地顯示微生物內(nèi)部的結(jié)構(gòu)。電子偏光顯微鏡標本必須要放在真空干操的狀態(tài)下檢查，是不能應用于觀察活的微生物。
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